Kvalitet uzorka iz EBUS-TBNA igala i molekularne patologije

Novi zahtjevi za odabir igala za jezgra tkiva, ćelijske blokove, NGS i PD-L1 testove

https://profed.olympuschina.com/gs/thoracicsurgery/12628/

U eri precizne onkologije,EBUS{0}}TBNAmora odgovoriti ne samo "Da li je rak?" ali također pružaju: histološku podtipizaciju (adenokarcinom/karcinom skvamoznih stanica/velike ćelije/NSCLC-NOS), Ki-67, TTF-1/p40 bojenje, PD-L1 ekspresija (klonovi 22C3/SP142, i dr., drajver, profil, mudraca) ROS1, BRAF, MET, RET, KRAS i široki NGS paneli). Ovo zahtijeva prinos DNK koji se obično kreće u rasponu od 10-250 ng po proceduri (ovisno o platformi) uz očuvanje arhitekture tkiva za IHC-sposobnosti koje premašuju one samo tradicionalnih FNA citoloških briseva. Shodno tome, dizajn EBUS igle evoluira prema "akviziciji tkiva" (FNB/prinos jezgra).

Vrste uzoraka i odnosi igala:

• FNA (aspiracija finom iglom):​ Stražnji-odrezani jednostruki-igle 21G/22G sa kosom + usisavanje pod negativnim pritiskom → klasteri ćelija + stromalni fragmenti → razmazi (Diff-Quik/H&E) + blok ćelija. Ćelijski blokovi dozvoljavaju IHC i neka molekularna testiranja, ali ograničeni volumen tkiva može spriječiti adekvatnost DNK za cijeli-eksom ili velike NGS panele.
• FNB (biopsija finom iglom):​ Franseen trostruke-igle, kruna-rezane ili ProCore obrnute-košene igle → trake tkiva/mikro{3}}jezgra → fiksni, ugrađeni dijelovi. Očuva arhitekturu tkiva, omogućavajući superioran IHC kvalitet i veći prinos DNK/RNA u poređenju sa ekvivalentnim blokovima FNA ćelija.
• 19G velike-lumenske igle:Veći unutrašnji prečnik aspirira male jezgre tkiva ili veće količine uzorka, pogodne za multipleksno testiranje, iako je neophodan oprez protiv kontaminacije krvi koja utiče na kvalitet uzorka.
• ROSE (brza na{0}}procjena lokacije) integracija:​ Na-citopatolozi/tehničari na licu mjesta preliminarno procjenjuju bris, procjenjujući ima li "adekvatne celularnosti", nekroze, granuloma ili limfoidnog tkiva, usmjeravajući odluke o prekidu uzorkovanja ili promjeni stanice. ROSE smanjuje prosječne prolaze iglom (često 3-4 naspram. 6-7 bez ROSE) i poboljšava stope adekvatnosti uzorka. Neki centri koriste fazno-kontrastnu mikroskopiju za trijažu staničnih blokova.

Implikacije za odabir igle vođen molekularnim testiranjem:​ Za pacijente sa NSCLC koji su podvrgnuti ciljanoj i imunoterapijskoj procjeni, preporuča se davanje prioriteta 19G FNB ili 21G Franseen FNB iglama gdje su dostupne, osiguravajući uzorkovanje iz najmanje 2-3 stanice kako bi se generirali i blokovi ćelija i jezgra tkiva. Samo citološki skrining može koristiti 22G FNA igle, ali zahtijeva povećan broj prolaza i pripremu ćelijskog bloka. Studije sugeriraju da je stopa uspjeha NGS-a veća kod uzoraka dobijenih putem 19G igala u poređenju sa 22G FNA, posebno za tumore bogate stromom ili paucicelularne tumore.

Preporuke za rukovanje uzorcima (često su detaljne u Uputstvima za upotrebu - IFU):​ Odmah isperite lumen igle nakon-punkcije sa BSA/PBS puferom u epruvetu za sakupljanje → procesirajte blok ćelije (fiksacija formalinom → ugrađivanje parafina) ili fiksirajte jezgre tkiva direktno u formalinu. Spriječite isušivanje lumena kako biste izbjegli ćelijsku degeneraciju. Upravljajte začepljenjem laganim pomicanjem stajleta ili primjenom kratkih zračnih mlazova-podvlačeći funkcionalnu svrhu stajleta (sprečavanje začepljenja + očuvanje integriteta uzorka).

U zaključku, EBUS-TBNA odabir igala se pomjera sa "samo prodiranja" na "prilagođavanje tipa igle i proceduralnog toka rada na osnovu zahtjeva molekularne patologije." Ova evolucija predstavlja žarište multidisciplinarne saradnje između medicinskih onkologa, patologa i interventnih pulmologa.